Los anticuerpos monoclonales ( mAb o moAb ) del son los anticuerpos que son idénticos porque son producidos por un tipo de la célula inmune que son todas las copias de una célula del solo padre. Dado (casi) cualquier sustancia, es posible crear los anticuerpos monoclonales que atan específicamente a esa sustancia; pueden entonces servir detectar o purificar esa sustancia. Esto se ha convertido en una herramienta importante en la bioquímica, la biología molecular y la medicina . Cuando está utilizado como medicaciones, el nombre genérico termina en el - mab (véase el " Nomenclatura del " de los anticuerpos monoclonales ;).
Descubrimiento
La idea de un " " de la bala mágica ; primero fue propuesto por el Paul Ehrlich que al principio del vigésimo siglo postuló que si un compuesto se podría hacer ese selectivamente apuntado un organismo enfermedad-que causaba, después una toxina para ese organismo se podría entregar junto con el agente de la selectividad.
En los años 70 el mieloma del cáncer de la B-célula era sabido, y era entendido que estas B-células cancerosas todas producen un solo tipo de anticuerpo (un Paraprotein ). Esto fue utilizada para estudiar la estructura de anticuerpos, pero no era todavía posible producir los anticuerpos idénticos específicos a un antígeno dado.
Un proceso de producir los anticuerpos monoclonales que implicaban las células híbridas del humano-ratón fue descrito por Jerrold Schwaber en el 1973 y sigue citado extensamente entre ésos usar los hibridomas humano-derivados., pero las demandas a la prioridad han sido polémicas. Un documento de la historia de la ciencia sobre el tema dio un cierto crédito a Schwaber para inventar una técnica que fue citada extensamente, pero detenido justo antes el sugerir de que lo habían engañado. La invención se acredita generalmente al Jorte Köhler, al César Milstein, y al Niels Kaj Jerne en el 1975 ; quién compartió el Premio Nobel Del en fisiología o la medicina en el 1984 para el descubrimiento. La idea dominante era utilizar una línea de células del mieloma que habían perdido su capacidad de secretar los anticuerpos, subidos con una técnica para fundir estas células con el anticuerpo sano produciendo las B-células, y puedan seleccionar para las células con éxito fundidas.
En el invierno 1988 de Greg y su equipo inició las técnicas para humanizar los anticuerpos monoclonales, quitando las reacciones que muchos anticuerpos monoclonales causados en algunos pacientes.
Producción
Producción de la célula del hibridoma
Los anticuerpos monoclonales son hechos fundiendo las células del bazo de un ratón que se ha inmunizado con el antígeno deseado con las células del mieloma. El glicol de polietileno se utiliza al fusible de las membranas de plasma adyacentes, pero el índice de éxito es bajo así que se utiliza un medio selectivo en el cual fundió solamente las células puede crecer. Esto es porque las células del mieloma han perdido la capacidad de sintetizar la transferasa de la hipoxantina-guanina-phosphoribosyl (HGPRT). Esta enzima permite a las células sintetizar las purinas usar una fuente extracelular de hipoxantina como precursor. Ordinariamente, la ausencia de HGPRT no es un problema para la célula porque las células tienen un camino bioquímico alterno que puedan utilizar para sintetizar las purinas. Sin embargo, cuando las células se exponen al aminopterin (un análogo del ácido fólico), no pueden utilizar este otro, rescate, camino y ahora son completamente dependiente en HGPRT para la supervivencia. El medio de cultivo selectivo se llama medio de HAT porque contiene:•
de la hipoxantina •
de Aminopterin • Thymidine
Este medio es selectivo para fundido, las células (del hibridoma) porque las células sin fundir del mieloma no pueden crecer porque carecen HGPRT. Las células normales sin fundir del bazo no pueden crecer indefinidamente debido a su vida limitada. Sin embargo, las células del hibridoma pueden crecer indefinidamente porque el socio de la célula del bazo suministra HGPRT y el socio del mieloma es inmortal porque es una célula cancerosa. Las células híbridas fundidas se llaman los hibridomas, y puesto que se derivan de las células cancerosas, son inmortales y se pueden crecer indefinidamente.
Esta mezcla de células entonces se diluye y las copias se crecen de las células del solo padre. Los anticuerpos secretados por las diversas copias entonces se prueban para que su capacidad ate al antígeno (por ejemplo con una prueba tal como EIA o análisis del Microarray del antígeno) o a la mancha blanca /negra inmuna del punto, y la copia más productiva y más estable entonces se crece en medio de cultivo a un en grandes cantidades. Cuando las células del hibridoma se inyectan en los ratones (en la cavidad peritoneal, la tripa), producen los tumores que contienen un líquido anticuerpo-rico llamado líquido de las ascitis .
El medio se debe enriquecer durante la selección para favorecer más lejos crecimiento del hibridoma. Esto se puede alcanzar por el uso de una capa de células del fibrocyte del alimentador o de medio del suplemento tal como Briclone . La producción en cultivo celular es generalmente preferred como la técnica de las ascitis es dolorosa al animal y si existen las técnicas del reemplazo, se considera poco ético.
Recombinante
La producción de anticuerpos monoclonales recombinantes implica las tecnologías, designadas la reproducción del repertorio del o la exhibición bacteriófaga /la exhibición de la levadura. La ingeniería recombinante del anticuerpo implica el uso de los virus o de la levadura de crear los anticuerpos, algo que ratones. Estas técnicas confían en la reproducción rápida de los segmentos del gene de la inmunoglobulina para crear bibliotecas de anticuerpos con secuencias levemente diversas del aminoácido de las cuales los anticuerpos con especificidades deseadas puedan ser seleccionados. Estas técnicas se pueden utilizar para realzar: la especificidad con la cual los anticuerpos reconocen los antígenos, su estabilidad en varias condiciones ambientales, su eficacia terapéutica, y su detectabilidad en usos de diagnóstico. Los compartimientos de fermentación se han utilizado para producir estos anticuerpos en un gran escala.
Usos
Los anticuerpos una vez monoclonales para una sustancia dada se han producido, ellos se pueden utilizar para detectar la presencia y la cantidad de esta sustancia, por ejemplo en una prueba occidental de la mancha blanca /negra (detectar una proteína en una membrana) o una prueba de la inmunofluorescencia (detectar una sustancia en una célula). Son también muy útiles en immunohistochemistry que detecten el antígeno en secciones fijas del tejido. Los anticuerpos monoclonales se pueden también utilizar para purificar una sustancia con las técnicas llamadas la inmunoprecipitación y la cromatografía de afinidad .
Anticuerpos monoclonales para el tratamiento contra el cáncer
considera también:
la terapia del anticuerpo monoclonal Un tratamiento posible para el cáncer implica los anticuerpos monoclonales que atan solamente a los antígenos célula-específicos del cáncer e inducen una respuesta inmunológica contra la célula cancerosa de la blanco. Tal mAb se podía también modificar para la entrega de la toxina, del radioisótopo, Cytokine o de la otra conjugación activa; es también posible diseñar los anticuerpos de Bispecific que pueden atar con sus regiones fabulosas para apuntar el antígeno y a una célula conyugal o effector. De hecho, cada anticuerpo intacto puede atar a los receptores de la célula o a otras proteínas con su región de Fc. La ilustración abajo demuestra todas estas posibilidades:
Anticuerpos quiméricos y humanizados
considera también:
humanizado del anticuerpo Un problema en usos médicos es que el procedimiento estándar de producir los anticuerpos monoclonales rinde los anticuerpos del ratón. Aunque los anticuerpos murine sean muy similares al ser humano unos hay diferencias. El sistema inmune humano por lo tanto reconoce los anticuerpos del ratón como extranjeros, rápido quitándolos de la circulación y causando efectos inflamatorios sistémicos.
Una solución a este problema sería generar los anticuerpos humanos directo de seres humanos. Sin embargo, esto no es fácil, sobre todo porque no se ve generalmente pues ético para desafiar a seres humanos con el antígeno para producir el anticuerpo; mientras que los éticas de hacer iguales a los no-seres humanos son una cuestión de discusión. Además, no es fácil generar los anticuerpos humanos contra tejidos humanos.
Los varios acercamientos usar la tecnología de DNA recombinante para superar este problema se han intentado desde el final de los '80. En un acercamiento, uno toma la DNA que codifica la porción obligatoria de anticuerpos monoclonales del ratón y la combina con el anticuerpo humano produciendo la DNA. Uno entonces utiliza los cultivos celulares mamíferos para expresar esta DNA y para producir este el mitad-ratón y los anticuerpos mitad-humanos. (Las bacterias no pueden ser utilizadas con este fin, puesto que no pueden producir esta clase de la glicoproteína .) Dependiendo de cómo es grande una parte del anticuerpo del ratón se utiliza, uno habla de los anticuerpos quiméricos o de los anticuerpos humanizados . Otro acercamiento implica el genético dirigido de los ratones para producir anticuerpos más human-like. Los anticuerpos monoclonales se han generado y se han aprobado para tratar: Cáncer, enfermedad cardiovascular, enfermedades inflamatorias, degeneración macular, Rechazamiento del trasplante, esclerosis múltiple, e infección viral (véase la terapia del anticuerpo monoclonal).
En agosto de 2006 la investigación y los fabricantes farmacéuticos de América divulgaron que las compañías de los E. tenían 160 diversos anticuerpos monoclonales en ensayos clínicos o aprobación el aguardar de la Agencia de Medicamentos y Alimentos .
Ejemplos
Ver también
Terapia del anticuerpo monoclonalNomenclatura de los anticuerpos monoclonales
Anticuerpo policlonal
Nanobodies
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