La fosfatasa alcalina (MONTAN@A del ) () es una enzima de la hidrolasa responsable de quitar grupos del fosfato de muchos tipos de moléculas, incluyendo los nucleótidos, las proteínas, y los alcaloides . El proceso de quitar el grupo del fosfato se llama la defosforilización . Pues el nombre sugiere, las fosfatasas alcalinas son las más eficaces de un ambiente alcalino .
Bacteriano
En las bacterias, la fosfatasa alcalina está situada en el
espacio periplásmico, external a la membrana celular . Puesto que
este espacio es mucho más conforme a la variación ambiental que el interior real de la célula, la fosfatasa alcalina bacteriana es comparativamente resistente a la inactivación, a la desnaturalización, y a la degradación, y también tiene un índice más alto de actividad. Aunque el
propósito real de la enzima todavía no se entienda completamente, la hipótesis simple, que es los medios para que las bacterias generen los grupos libres del fosfato para la absorción y el uso, es apoyada por el hecho de que la fosfatasa alcalina generalmente es producida solamente por las bacterias durante el hambre del fosfato y no cuando fosfato es abundante. Sin embargo, otras posibilidades existen; por ejemplo, la presencia de grupos del fosfato evita generalmente que
las moléculas orgánicas pasen a través de la membrana, por lo tanto desfosforilatarlas pueden ser importantes para la absorción bacteriana de compuestos orgánicos en el salvaje. Algunas complejidades de la regulación bacteriana y del
metabolismo sugieren que otra, más sutil, los propósitos para la enzima pueda también desempeñar un papel de la célula. En el laboratorio, sin embargo, el Escherichia Coli
mutante que carece la fosfatasa alcalina sobrevive absolutamente bien, al igual que los mutantes incapaces de apagar la producción de la fosfatasa alcalina.
Uso en la investigación
Las fosfatasas alcalinas mas comunes usadas en la investigación son:
Fosfatasa alcalina bacteriana (BAP), de las células de Escherichia Coli C4
Fosfatasa alcalina del camarón (SAP), de una especie del camarón ártico (borealis de Pandalus)
Fosfatasa alcalina del intestino del becerro (CIAP), del intestino del becerro
Fosfatasa alcalina placentaria (PLAP) y su versión terminal truncada que carece los 24 aminoácidos pasados (que constituyen el dominio de la transmembrana) - la fosfatasa alcalina secretada (SEAP) de C
La fosfatasa alcalina se ha convertido en una herramienta útil en laboratorios de la biología molecular, puesto que la DNA posee normalmente grupos del fosfato en extremo de 5 '. La eliminación de estos fosfatos previene la DNA que liga (el extremo de 5 ' extremo que ata 3 ' de otra molécula), de tal modo previniendo la degradación de la DNA hasta el paso siguiente del proceso para el cual se está preparando; también, el retiro de los grupos del fosfato permite que el Radiolabeling (reemplazo por los grupos radiactivos del fosfato) para medir la presencia de la DNA etiquetada con otros pasos en el proceso o el experimento. Para estos propósitos, la fosfatasa alcalina del camarón es la más útil, pues es el más fácil hacerlo inactivo una vez ha hecho su trabajo.
Otro uso importante de la fosfatasa alcalina está como etiqueta para los immunoensayos de la enzima
Uno de uso común en el sector lechero está como marcador de la pasterización. Esta molécula es desnaturalizada por las temperaturas elevated encontradas durante la pasterización, y se puede probar para vía el cambio del color de un substrato del fosfato del para-nitro-fenol en una solución tampón. (Prueba de Aschaffenburg Mullen) la leche cruda produciría típicamente una coloración amarilla dentro de uces par de minutos, mientras que la leche correctamente pasterizada no debe demostrar ninguÌn cambio. Hay por supuesto excepciones a esto en el caso de los phophatases alcalinos termoestables producidos por algunas bacterias.
Inhibidores
Todos los isoenzimas mamíferos de la fosfatasa alcalina excepto el placentario (PLAP y SEAP) son inhibidos por el Homoarginine y semejantemente todo excepto los intestinales y placentarios son bloqueados por el Levamisole . La calefacción por ~2 horas en 65
oC hizo inactivo la
mayoría de los isoenzimas excepto isoforms placentarios (PLAP y SEAP).
Humano
En seres humanos, la fosfatasa alcalina está presente en todos los tejidos a través del cuerpo entero, pero se concentra particularmente en el hígado, el hepático, el riñón, el hueso, y la placenta . El pH óptimo para la actividad enzimática es pH=10 en condiciones estándar (298K, 1 atmósfera).
Uso de diagnóstico
Los niveles del
plasma de sangre (suero) de MONTAN@A son típicamente 20-70 unidades por litro en los adultos (referencia - USMLE), dependiendo del análisis y de las pautas normales locales. Los niveles son perceptiblemente más altos en niños y mujeres embarazadas.
Los niveles bajados de MONTAN@A son menos comunes que niveles elevated.
Las condiciones siguientes pueden causar niveles anormales de MONTAN@A:
Niveles Elevated (hyperphosphatasemia)
Si es confuso porqué la fosfatasa alcalina es elevated, los estudios del isoenzima usar la electroforesis pueden confirmar la fuente de la MONTAN@A. La
estabilidad al calor también distingue los isoenzimas del hueso y del hígado (" quemaduras del hueso, lasts" del hígado;).
hígado (MONTAN@A l hígado): Colestasis,
colesistitis, colangitis, cirrosis, hepatitis, hígado graso, tumor, intoxicación del hígado de la droga de las metástasis del hígado N. regla concurrentemente elevada de las ayudas de GGT (transpeptidasa gamma del glutamil) a favor de la metástasis del
hígado (algo que el hueso, el riñón, el etc.) al determinar la extensión del cáncer.
El narcotiza : e. verapamil, Carbamazepine, Phenytoin, eritromicina, Allopurinol, Ranitidine
Enfermedad del hueso (MONTAN@A del hueso): Enfermedad, osteosarcoma, metástasis de Paget del hueso del cáncer prostático (colmo/valores muy altos de la MONTAN@A)
Otras metástasis del hueso
Hueso fracturado
Mieloma múltiple (solamente cuando está asociado a fracturas)
Implicación esquelética de otras enfermedades primarias: Osteomalacia, raquitismo, deficiencia de la vitamina D, (subida moderada)
Tumores malos (MONTAN@A que origina de tumor)
Enfermedad renal ( secundario Hyperparathyroidism )
Hipotiroidismo primario
Polycythemia vera
Myelofibrosis
Reacción leucemoide a la infección
Mujeres que usan la contracepción hormonal
Embarazo
Obstrucción biliar
Hyperphosphatasaemia transitorio de la infancia: benigno, asociado a menudo a la infección
Niveles bajados (hypophosphatasemia)
Hypophosphatasia, una enfermedad recesiva de un autosoma
Mujeres posmenopáusicas que reciben la terapia del estrógeno debido a la osteoporosis
Hombres con la cirugía de corazón reciente, la desnutrición, la deficiencia del magnesio, el hipotiroidismo o la anemia severa
Niños con el Achondroplasia y el cretinismo
Niños después de una enteritis severa
Anemia perniciosa
Anemia aplástica
Leucemia mielógena crónica
Otras notas
La fosfatasa alcalina (REGAZO) del leucocito se encuentra dentro de los glóbulos blancos que los niveles de sangre de de REGAZO pueden ayudar en la diagnosis de la leucemia mielógena crónica (CML) y de la reacción leucemoide .
Ver también
Pruebas de función hepática Fosfatasa ácida
.
ZenithicIsotopes of tungsten