Un golpe de gracia del gene del es una técnica genética en la cual un organismo se dirige para llevar los genes que se han hecho inoperantes (ha sido el " out" golpeado; del organismo). Esto se hace para los propósitos de la investigación. También conocido como los organismos del golpe de gracia del o simplemente golpes de gracia, se utilizan en el aprendizaje sobre un gene que ha sido ordenados, pero que tiene un desconocido o una función incompleto sabida. Los investigadores extraen inferencias de la diferencia entre el organismo del golpe de gracia y los individuos del normal.

El término también refiere al proceso de crear tal organismo, como en " golpear el out" un gene.

Método

El golpe de gracia es realizado con una combinación de técnicas, comenzando en el tubo de prueba con el plásmido, el cromosoma artificial bacteriano o la otra construcción de la DNA, y procediendo al cultivo celular . Las células individuales son genético transformados con la construcción de la DNA. La meta es a menudo crear un animal transgénico que tenga el gene alterado. Si es así las células de vástago embrionarias genético se transforman e insertado en los embriones tempranos animales resultantes con el cambio genético en sus células de Germline puede entonces pasar a menudo el golpe de gracia del gene a las futuras generaciones.

La construcción se dirige al recombina con el gene de la blanco, que es logrado incorporando las secuencias del gene sí mismo en la construcción. La recombinación entonces ocurre en la región de esa secuencia dentro del gene, dando por resultado la inserción de una secuencia extranjera para interrumpir el gene. Con su secuencia interrumpida, el gene alterado en la mayoría de los casos será traducido en una proteína no funcional, si se traduce en absoluto.

Un golpe de gracia condicional permite la canceladura del gene de una manera del específico del tejido o del tiempo.

Porque el tipo deseado de la recombinación de la DNA es un acontecimiento raro en el caso de la mayoría de las células y de la mayoría de las construcciones, la secuencia extranjera elegida para la inserción incluye generalmente a reportero . Esto permite la selección fácil de células o de individuos en los cuales el golpe de gracia era acertado. A veces los partes movibles de la construcción de la DNA en un cromosoma sin la recombinación homóloga deseada con el gene de la blanco. Para evitar el aislamiento de tales células, la construcción de la DNA contiene a menudo una segunda región de DNA que permita que desechaas tales células sean identificadas y.

En los organismos diploides, que contienen dos alelos para la mayoría de los genes, y puede también contener varios genes relacionados que colaboren en el mismo papel, redondos adicionales de la transformación y se realiza la selección hasta que se elimine cada gene apuntado. La cría selectiva se puede requerir para producir animales homocigóticos del golpe de gracia .

Golpear-en es similar al golpe de gracia, sino que por el contrario substituye un gene por otro en vez de suprimirlo.

Ver también

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