La ligadura química es un sistema de técnicas usadas para crear el péptido largo o cadenas de la proteína . Es el segundo paso de un acercamiento convergente . Primero péptidos más pequeños que contienen 30-50 aminoácidos son preparados por la síntesis química convencional del péptido. Entonces deprotected totalmente. La ligadura química es la técnica de juntar estos péptidos por la reacción chemoselective para dar un producto único de la reacción, generalmente en la solución acuosa. Con varios pasos del acoplador, las proteínas de hasta 200-300 aminoácidos pueden ser producidas.

Métodos de ligadura química

Hay varias técnicas descritas en literatura. El método más práctico y más robusto para la reacción chemoselective de péptidos desprotegidos es la ligadura química nativa . La ligadura química nativa ha superado las limitaciones del acercamiento clásico de la química orgánica sintética a la síntesis total de proteínas, y permite la síntesis total o semi- rutinaria de las moléculas de proteína. Los métodos químicos originales de la ligadura implicaron la formación de un enlace extranjero en el sitio de la ligadura. Posteriormente, la ligadura química nativa fue desarrollada. De acuerdo con química primero divulgó en 1953 de Theodor Weiland, un péptido-tioéster desprotegido reacciona con un Cys-péptido para dar un producto de la ligadura con un enlace de péptido en el sitio de la ligadura. En este método, el intermedio tioéster-ligado inicial del producto de la ligadura cambia para formar un enlace de la amida.

La ligadura química nativa confía en la presencia de un residuo de la cisteína en el sitio de la ligadura, el segundo que menos aminoácido común encontró en proteínas. Los métodos usar grupos auxiliares desprendibles pueden superar esta limitación a veces, al igual que el uso de la desulfurización subsecuente a la ligadura (e. convirtiendo un Cys a un Ala).

Ligadura expresada de la proteína

Explotando el natural Inteins es posible preparar un tioéster recombinante del C-terminal del polipéptido . Esto quita la restricción del tamaño del fragmento del tioéster del C-terminal usado en la ligadura química nativa. El tioéster recombinante se puede ligar a un péptido sintético que lleva una cisteína del N-terminal. La ligadura química nativa de esta clase usar los tioésteres recombinantes del C-terminal se conoce como ligadura expresada de la proteína. La expresión recombinante se puede también utilizar para dar un Cys-polipéptido para el uso en la ligadura química nativa. ¡químico nativo de la ligadura -->

Ligadura de Staudinger

La ligadura de Staudinger, primero divulgada en 2000, permite la ligadura de la independiente de los segmentos del péptido de los aminoácidos terminales. El método se basa en la reacción de Staudinger. La ligadura de Staudinger continúa siendo desarrollada y todavía no ha encontrado uso extenso.

Zenithic

Geoff Dymock

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