Un resumen de la restricción del es un procedimiento usado en la biología molecular para preparar la DNA para el análisis o el otro proceso. También se conoce como fragmentación de la DNA del . Utiliza un número de enzimas de la restricción para hender selectivamente filamentos de la DNA en fragmentos más cortos, o para aislar fragmentos cortos del interés. La DNA digerida resultante se amplifica muy a menudo selectivamente usar la polimerización en cadena, haciendo lo más conveniente para las técnicas analíticas tales como electroforesis del gel de la agarosa, y la cromatografía . Se utiliza en la huella dactilar genética, y el análisis PTFR.

Una enzima dada de la restricción corta segmentos de la DNA dentro de una secuencia de nucleótido específica . Estas secuencias del reconocimiento del son típicamente cuatro, seis, ocho, diez, o doce nucleótidos de largo. Porque hay solamente tan muchas maneras de arreglar los cuatro nucleótidos que componen la DNA (adenina, Thymine, guanina y citosina) en cuatro a la secuencia del doce-nucleótido, las secuencias del reconocimiento tienden a ocurrir por casualidad en cualquier secuencia larga. Las enzimas de la restricción específicas a los centenares de secuencias distintas se han identificado y se han sintetizado para la venta a los laboratorios, y consecuentemente, varios " potencial; sites" de la restricción; aparecer en casi cualquier gene o lugar geométrico del interés en cualquier cromosoma. Además, casi todos los plásmidos artificiales incluyen (a menudo enteramente un polylinker del sintético) (también llamado " site" múltiple de la reproducción;) eso contiene docenas de secuencias del reconocimiento de la enzima de la restricción dentro de un segmento muy corto de la DNA. Esto permite la inserción de casi cualquier fragmento específico de la DNA en los vectores del plásmido, que pueden ser eficientemente " cloned" por la inserción en el repliegue de las células bacterianas.

Después de que el resumen de la restricción, DNA se pueda entonces analizar usar electroforesis del gel. En electroforesis del gel, una muestra de DNA es primer " loaded" sobre una losa del gel de la agarosa (litterally medido con una pipeta en pequeños pozos en un extremo de la losa). El gel entonces se sujeta a una corriente eléctrica, que dibuja negativamente - DNA cargada a través de él. En electroforesis del gel, las moléculas viajan en diversas tarifas (y por lo tanto diversas distancias) dependiendo de su carga neta (más alto - las partículas cargadas viajan más lejos), y clasifican (partículas más pequeñas viajan más lejos). Puesto que ningunas de las cuatro bases del nucleótido llevan cualquier carga, la carga neta llega a ser insignificante y el tamaño es el factor principal que afecta al índice de difusión a través del gel. La carga neta en la DNA es producida por la espina dorsal del azúcar-fosfato. Esto está en contraste con las proteínas, en las cuales no hay " backbone", y la carga neta es generada por diversos combinaciones y números de los aminoácidos cargados .

Aplicaciones posibles

Los resúmenes de la restricción son necesarios para realizar técnicas analíticas de siguiente unas de los:
PTFR - Polimorfismo de la longitud del fragmento de la restricción
AFLP - Polimorfismo amplificado de la longitud del fragmento
RAPD - DNA polimórfica aleatoriamente amplificada
STRP - Polimorfismo simple de la repetición en tándem

Varias enzimas de la restricción

Hay tipos numerosos de enzimas de la restricción, que cortarán la DNA diferentemente. (Véase el artículo sobre las enzimas de la restricción para los ejemplos). Hay algo que corta una secuencia baja de tres pares mientras que otros pueden cortar cuatro, seises, e incluso ocho. Cada enzima tiene características distintas que determinen cómo pueden cortar eficientemente y bajo qué condiciones. La mayoría de los fabricantes que produce tales enzimas proporcionarán a menudo una solución tampón específica que contenga la mezcla única de cationes y otros componentes que ayudan a la enzima en el corte tan eficientemente como sea posible. Diversas enzimas de la restricción también tienen diversas temperaturas óptimas bajo las cuales funcionen.